Nöroblastoma Hücre Kültüründe Glutamat Aracılı Oluşturulan Nörotoksisiteye Oksitosinin Etkileri

Börte GÜRBÜZ ÖZGÜR, Kamil VURAL, Mehmet İbrahim TUĞLU
2024 Mart - 61 (1)
TÜRKÇE PDF İNGİLİZCE PDF

Öne Çıkan Noktalar

• Oksitosin, glutamatın hücre proliferasyonuna olan
olumsuz etkisini azalttığı,
• Oksitosinin farklı dozlarda glutamat toksisitesine hücre
proliferasyonunda etkisi olduğu,
• Oksitosin uygulamasının glutamat toksisitesine bağlı
hücre ölümüne engel olduğu,
• Glutamat varlığında oksitosinin farklı dozlarında
antiapoptotik etkisi olduğu belirlendi.


Türkçe Özet

Amaç: Bu çalışmada insan nöroblastoma SH-SY5Y hücre kültüründe
glutamat ile oluşturulan nörotoksisitede, oksitosinin nörit büyümesi,
hücre canlılığı, hücre proliferasyonu ve apoptozise olan etkilerinin
araştırılması ve olası nöroprotektif etkinliğinin gösterilmesi amaçlanmıştır.
Yöntem: Oksitosinin, glutamatın toksisitesi üzerine etkileri insan
nöroblastoma SH-SY5Y hücre hattında Nörotoksisite Tarama Testi
(NTT), apoptotik etkileri terminal deoksinükleotidil transferaz
kırık-uç işaretlenmesi (TUNEL) yöntemi ve hücre canlılık testi
3-(4.5-dimetiltiyazol-2-il)-2.5-difeniltetrazolyum bromid (MTT) yöntemi
ile incelendi. Nörotoksisite tarama testinde; hücre kültürüne glutamat 32
μM konsantrasyonunda eklenerek nörotoksisite oluşturuldu. Oksitosin 1,
3, 10, 30 ve 100 μM konsantrasyonlarında eklenerek nörit inhibisyonuna
etkisi incelendi. Glutamat uygulamasının apoptozise neden olduğu
TUNEL yöntemi ile gösterildi. Glutamat ile birlikte oksitosinin farklı
dozlarda verildiğinde ortaya çıkan antiapoptotik etki apoptotik endeks
ile değerlendirildi.
Bulgular: Glutamatın doz bağımlı nörotoksik etki gösterdiği ve 32 μM
konsantrasyonda nörit uzamasını %50 oranında azalttığı saptandı.
Glutamat ile oluşan nörit uzaması inhibisyonunun oksitosin uygulanarak
doza bağımlı olarak azaldığı gösterildi. Özellikle oksitosinin 10 μM
konsantrasyonlarından itibaren anlamlı olarak nörit inhibisyonunu
azalttığı ve nöroprotektif etki gösterdiği tespit edildi. Hücre canlılık testi
(MTT) sonucuna göre glutamatın hücre proliferasyonunu %50 azalttığı
konsantrasyon 54 μM olarak belirlendi. Ardından oksitosin uygulaması
ile glutamatın hücre proliferasyonuna olan olumsuz etkisini oksitosinin
doza bağımlı olarak anlamlı olarak azalttığı görüldü.
Sonuç: Glutamatın farklı konsantrasyonlarda hücre çoğalması ve canlılığı
üzerinde anlamlı toksik etkiye sahip olduğu; oksitosinin ise glutamat ile
oluşan nörit inhibisyonunu azalttığı, nöroprotektif etkisi olduğu, hücre
canlılığını artırdığı ve antiapoptotik etkilerinin olduğu gösterildi.
Anahtar Sözcükler: İn vitro, nöroprotektif, nörotoksisite, oksitosin, SY5Y